Titelaufnahme

Titel
In vivo effects of fibroblasts and mesenchymal stromal cells on angiogenic processes in a mouse model / submitted by Manuela Kinzer
Verfasser/ VerfasserinKinzer, Manuela
Begutachter / BegutachterinLang-Olip, Ingrid
Erschienen2013
UmfangVIII, 76 Bl. : 2 Zsfassungen ; Ill.
HochschulschriftGraz, Univ., Masterarb., 2013
Anmerkung
Zsfassung in dt. und engl. Sprache
SpracheEnglisch
DokumenttypMasterarbeit
Schlagwörter (GND)Maus / Zelltransplantation / Mesenchymzelle / Immuncytochemie / Maus / Zelltransplantation / Mesenchymzelle / Immuncytochemie / Online-Publikation
URNurn:nbn:at:at-ubg:1-52593 Persistent Identifier (URN)
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In vivo effects of fibroblasts and mesenchymal stromal cells on angiogenic processes in a mouse model [4.72 mb]
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Zusammenfassung (Deutsch)

Zelltransplantation von mesenchymalen Stromazellen (MSC) gilt als vielversprechende Strategie zur Revaskularisierung ischämischer Gewebe. MSC der humanen Plazenta können in großen Mengen isoliert werden und weisen eine niedrige Immunogenität auf. Vorangegangene in vitro Studien zeigten, dass mesenchymale Stromazellen des plazentaren Amnions (hAMSC) sowie plazentare Fibroblasten (PlFbl), isoliert aus Gefäß-Explantaten des Chorions, pro-angiogene Faktoren sezernieren und die Vitalität von Endothelzellen positiv beeinflussen. Das Ziel dieser Studie ist, angiogene Effekte von hAMSC und PlFbl in vivo zu überprüfen.Die Zellen wurden mittels Durchflusszytometrie und Immunzytochemie analysiert. Für die in vivo Versuche wurden hAMSC bzw. PlFbl sowie plazentare Endothelzellen (PlEC), entweder einzeln oder in Kombination, in Matrigel suspendiert und subkutan in immundefiziente Mäuse injiziert. Nach 14 bis 28 Tagen wurden die Proben histologisch untersucht. Humane Kapillaren wurden quantifiziert.hAMSC und PlFbl ähneln sich morphologisch und in der Expression diverser Oberflächenmerkmale (CD10+, CD13+, CD29+, CD49a+, CD63+, CD73+, CD90+, CD105+, CD166+, HLA-ABC+, CD3-, CD14-, CD15-, CD19-, CD31-, CD45-, CD271-, HLA-DR-, AP-, MSCA-1-, Myosin-, Desmin-, smAktin-). In vivo induzierten separat applizierte hAMSC keine Kapillarbildung, hemmten aber die Migration von Mauszellen in das Matrigel. PlEC alleine zeigten diesen Effekt nicht und bildeten nur wenige humane Kapillaren, die bis zu 0,02% der Matrigelfläche bedeckten. Die Kombination von PlEC und hAMSC erzielte eine erhöhte Kapillarbildung (0,27?1,44%), was die pro-angiogenen Effekte von hAMSC bestätigt. Die humanen Kapillaren haben sich erfolgreich mit dem Gefäßsystem der Maus verbunden. In vivo Versuche mit PlFbl führten nicht zu repräsentativen Resultaten. Die angiogenen Effekte von PlFbl sollten in Folgestudien überprüft werden. Beide Zelltypen könnten eine wertvolle Quelle für zelluläre angiogene Applikationen darstellen.

Zusammenfassung (Englisch)

Cell transplantation of mesenchymal stromal cells (MSC) is considered as a promising strategy for the revascularization of ischemic tissue. MSC from the human placenta are immunologically well tolerated and available in large supply. Recently, it was shown that both amnion-derived MSC (hAMSC) as well as placental fibroblasts (PlFbl), isolated from chorionic vessel explants, enhance endothelial cell viability in vitro via secretion of angiogenic factors. The aim of this study was to evaluate the angiogenic effects of hAMSC and PlFbl in vivo.Both cell types were characterized by flow cytometry and immunocytochemistry. For in vivo experiments, cells were suspended in Matrigel and injected subcutaneously into the flank of immune-deficient mice. hAMSC or PlFbl and placental endothelial cells (PlEC) were applied both separately or combined. Matrigel plugs were excised after 14 or 28 days and analyzed histologically. Blood vessels of human origin were quantified.hAMSC and PlFbl were similar regarding morphology and expression of numerous surface markers (CD10+, CD13+, CD29+, CD49a+, CD63+, CD73+, CD90+, CD105+, CD166+, HLA-ABC+, CD3-, CD14-, CD15-, CD19-, CD31-, CD45-, CD271-, HLA-DR-, AP-, MSCA-1-, myosin-, desmin-, smActin-). hAMSC alone did not induce any capillary formation in vivo, but prevented immigration of mouse cells into the plug. Application of PlEC did not show this effect, yet formed few human capillaries, which covered up to 0.02 % of the Matrigel area. The highest density of capillaries was achieved by the combined application of PlEC plus hAMSC (0.27 ? 1.44%). Results indicate pro-angiogenic effects of hAMSC in vivo. Immunohistochemistry confirmed the successful connection of the newly formed human capillaries to the mouse vasculature. In vivo experiments with PlFbl did not lead to representative results and their angiogenic potential should be further investigated. Both cell types might be attractive candidates for cell-based angiogenic therapies.