Titelaufnahme

Titel
Development of a LC-MS/MS method for the quantification of the neurotransmitters serotonin, dopamine, adenosine, acetylcholine in cerebral mice microdialysis samples after treatment by different stimuli / [Irina Maria Bretis]
Verfasser/ VerfasserinBretis, Irina Maria
Begutachter / BegutachterinSchmid Martin
Erschienen[ca. 2013]
UmfangIll., graph. Darst. : 2 Zsfassungen
HochschulschriftGraz, Univ., Dipl.-Arb., 2013
Anmerkung
Zsfassungen in dt. und engl. Sprache
SpracheEnglisch
DokumenttypDiplomarbeit
Schlagwörter (GND)Neurotransmitter / Maus / Gehirn / LC-MS / Neurotransmitter / Maus / Gehirn / LC-MS / Online-Publikation
URNurn:nbn:at:at-ubg:1-49816 Persistent Identifier (URN)
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Development of a LC-MS/MS method for the quantification of the neurotransmitters serotonin, dopamine, adenosine, acetylcholine in cerebral mice microdialysis samples after treatment by different stimuli [20.8 mb]
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Zusammenfassung (Deutsch)

In den vergangenen Jahren wurden viele verschiedene Methoden zur Bestimmungder Veränderung von Neurotransmittern in der Flu?ssigkeit des Gehirns vonNagetieren entwickelt.Fu?r das Verstehen der Reaktionen von den Komponenten nach der Verabreichungvon verschiedenen Stimulantien besteht ein weltweites Interesse.Der Zweck unserer Studie war, eine Methode zu entwickeln, die gleichzeitig eineAuswahl von Neurotransmittern aus nur einem Durchlauf von einer Probeanalysieren kann um Zeit zu sparen, wie auch das Leben von Nagetieren zu retten.Wir entwickelten eine schnelle und empfindliche Flu?ssigkeitschromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (LC-MS/MS), um die Möglichkeit zu haben, Dopamin(DA), 5-hydroxytryptamine oder Serotonin (5-HT), Acetylcholin (ACh) und Adenosin(ADE) gleichzeitig aus einem Mäusehirnmikrodialysat zu messen.In dieser Entwicklung arbeiteten wir an der Optimierung der chromatographischenund massenspektrometrischen Parameter, um die höchst mögliche Empfindlichkeitzu erreichen.Während unserer Studie untersuchten wir genau die Sensitivität, Selektivität, denMatrix-Effekt und die Stabilität des Verfahrens.Das interessanteste Ergebnis war die besten Retentionszeiten fu?r alle Verbindungenherauszufinden, was sich wegen ihrer geringen Molekulargewichte als sehr schwierigerwies. Dies war nur unter optimalen Bedingungen möglich.Aufgrund der Ergebnisse unserer Untersuchung wird gezeigt, dass die neuentwickelte LC-MS/MS Methode sehr stabil ist. Diese Methode wurde zur Analysevon Mikrodialysatproben aus dem Gehirn der Maus angewendet.Mit diesen entwickelten Bedingungen ist es möglich genaue Ergebnisse derextrazellulären Konzentration von DA, 5-HT, ACh und ADE aus der Flu?ssigkeit desNucleus accumbens von dem Gehirn der Maus nach der Verabreichung vonAmphetamin und Kokain zu erhalten.Alles in allem entwickelten wir eine sehr stabile und zukunftsorientierte Methode mitsehr guten Voraussetzungen fu?r zuku?nftige Studien.

Zusammenfassung (Englisch)

In the past years a lot of different methods to determine the change ofneurotransmitters in the fluid of the brain of rodents were developed.Understanding the reactions of the compounds after the administration of stimuli is ofwidely spread interest.Literature shows a lot of approaches to analyze neurotransmitters, e.g. acetylcholine(ACh), from the brain of rats.The purpose of our study was to develop a method, which can be used to analyze achoice of neurotransmitters in one run from only one sample of a mouse brain inorder to save time and the lives of rodents.We developed a rapid and sensitive liquid chromatography/tandem massspectrometry (LC-MS/MS) to have the possibility to measure dopamine (DA), 5-hydroxytryptamine or serotonin (5-HT), acetylcholine (ACh) and adenosine (ADE)simultaneously from mouse brain microdialysates.In this development we worked on the optimization of chromatographic and massspectrometric parameters to get the highest possible sensitivity.During our study we investigated accurately the sensitivity, selectivity, matrix effectand stability of the method.The most interesting result was to find out the best retention times for all compounds.Due to their low molecular weight it was very difficult. It was only possible for us tosucceed under perfect circumstances.The new developed LC-MS/MS method is a stable measurement that is shown in thisthesis due to the results of our investigation and the method was applied to theanalysis of microdialysis samples collected from mouse brain.Under the developed conditions it is possible to get accurate results of theextracellular levels of DA, 5-HT, ACh and ADE from the fluid of the nucleusaccumbens of the mouse brain after the administration of amphetamine and cocaine.All in all we developed a very stable and future-oriented method with the bestconditions for future studies.