Titelaufnahme

Titel
The role of sphingolipids in gliomagenesis / submitted by Sabine Damm
Verfasser/ VerfasserinDamm, Sabine
Begutachter / BegutachterinSattler, Wolfgang ; Zimmer, Andreas
Erschienen2013
Umfang132 Bl. : 2 Zsfassungen ; Ill., graph. Darst.
HochschulschriftGraz, Univ., Diss., 2013
Anmerkung
Zsfassung in dt. und engl. Sprache
SpracheEnglisch
Bibl. ReferenzOeBB
DokumenttypDissertation
Schlagwörter (GND)Glioblastom / Sphingolipide / Glioblastom / Sphingolipide / Online-Publikation
URNurn:nbn:at:at-ubg:1-45503 Persistent Identifier (URN)
Zugriffsbeschränkung
 Das Werk ist frei verfügbar
Dateien
The role of sphingolipids in gliomagenesis [3.86 mb]
Links
Nachweis
Klassifikation
Zusammenfassung (Deutsch)

Glioblastoma multiforme ist der häufigste maligne primäre Hirntumor mit einer mittleren Patientenüberlebenszeit von ca. 14 Monaten ab Diagnose. Sphingosin 1 phosphat (S1P) ist ein Lipidsignalmolekül, das GBM Proliferation, Migration und Invasion beeinflusst. S1P Synthese wird durch Serin Palmitoyltransferase eingeleitet, dem ersten Enzym der de novo Sphingolipid Biosynthese oder durch Hydrolyse von Sphingomyelin. S1P ist intrazellulär ein sekundärer Botenstoff oder aktiviert extrazellulär fünf zellmembranständige Rezeptoren. Viele Zelltypen, die S1P synthetisieren, können S1P auch sekretieren und dadurch Signalwege aktivieren, die wichtig in der Tumorbiologie sind. S1P aktiviert auch Protein Kinase D2 (PRKD2) ein Mediator des Glioblastomwachstums.Exogenes S1P in physiologisch relevanten Konzentrationen steigerte das Wachstum von U87MG Zellen. Pharmakologische Inhibierung oder RNAi an unterschiedlichen Stellen der S1P Biosynthese verringerten die Proliferation, anschließende Zugabe von S1P steigerte das Wachstum wieder. ABCA1 wurde gehemmt um festzustellen ob der S1P Export in U87MG Zellen über ABCA1 stattfindet. Dies hatte einen antiproliferativen Effekt, aber Zugabe von S1P hob die proliferative Blockierung auf. Allerdings konnten wir keine extrazellularen Änderungen der S1P Konzentration nach Hemmung von ABCA1 detektieren.Zeitraffermikroskopie zeigte, dass ungerichtete Migration nach Hemmung von S1PR1, S1PR3 und PRKD2 verringert war. PRKD2 Gen-Silencing verringerte auch die gerichtete Migration und Invasion und hemmte p44/42 MAPK, p46/54 JNK, nukleares c-Jun und c-JunS73 Phosphorylierung. qPCR Array Analysen zeigten, dass Hemmung von PRKD2 mRNA Levels von Integrin ?2 und ??4, Plasminogen Aktivator Urokinase und seinem Rezeptor, und Matrix-Metallopeptidase 1 herunter regulierte.Zusammengefasst zeigten wir, dass S1P eine wichtige Rolle beim U87MG Wachstum spielt und identifizierten einen S1P/PRKD2/MAPK Signalweg, der zur U87MG Migration und Invasion beiträgt.

Zusammenfassung (Englisch)

Glioblastoma multiforme (GBM) is the most common and malignant primary brain tumor with a median patient life span of approximately 14 months from diagnosis. Sphingosine 1 phosphate (S1P) is a lipid signaling molecule that affects GBM cell proliferation, migration and invasion. S1P synthesis is initiated by serine palmitoyltransferase via the de novo sphingolipid biosynthesis or from hydrolysis of sphingomyelin. S1P acts intracellular as second messenger or activates extracellular five cell surface receptors. Many cell types that are capable of S1P synthesis are also able to secrete it thereby activating signaling pathways that play a role in tumor biology. S1P activates also protein kinase D2 (PRKD2) which is a potent mediator of glioblastoma growth. Exogenous S1P at physiologically occurring concentrations enhanced proliferation of U87MG cells. Pharmacological inhibition or RNAi at different sites of S1P biosynthesis impaired proliferation but subsequently S1P-addition restored proliferation. ABCA1 was inhibited to determine if S1P export is mediated by ABCA1 in U87MG cells. The Inhibition of ABCA1 revealed an antiproliferative effect and addition of exogenous S1P reversed the proliferative block, but we could not detect changes of extracellular S1P levels after ABCA1 silencing. Time-lapse microscopy demonstrated that random migration was diminished in S1PR1, S1PR3 or PRKD2 silenced cells. Pharmacological inhibition or RNAi of PRKD2 decreased chemotactic migration and invasion. PRKD2 silencing decreased p44/42 MAPK, p46/54 JNK, nuclear c-Jun and c-JunS73 phosphorylation. qPCR array analyses revealed that silencing of PRKD2 downregulated mRNA levels of integrin ?2 and ??4, plasminogen activator urokinase and its receptor, and matrix metallopeptidase 1.In summary, the present study indicates that S1P plays a major role in the promotion of U87MG growth and we identify a S1P/PRKD2/MAPK signaling pathway that contributes to U87MG cell migration and invasion.