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Title
Protein-protein interactions of TRPC3 and ORAI1 / Claire Jean-Quartier
AuthorJean-Quartier, Claire
CensorGroschner Klaus
Published2011
Description54 Bl. : Zsfassung ; Ill.
Institutional NoteGraz, Univ., Masterarb., 2011
Annotation
Zsfassung in dt. Sprache
LanguageEnglish
Document typeMaster Thesis
Keywords (GND)Protein-Protein-Wechselwirkung / Basophile Zelle / Leukämie / Ratte / Protein-Protein-Wechselwirkung / Basophile Zelle / Leukämie / Ratte / Online-Publikation
URNurn:nbn:at:at-ubg:1-22735 Persistent Identifier (URN)
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Protein-protein interactions of TRPC3 and ORAI1 [3.59 mb]
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Abstract (German)

Die Familie der transienten Rezeptor-Potential Ionenkanle (TRP) ist in verschiedenstenZelltypen über den ganzen Körper verteilt zu finden. Vertreter der ORAIFamilewurden als Poren-bildende Membran-Proteine identifiziert, welche am Speicher-gesteuerten Ca2+-Eintritt beteiligt sind. Bisher ist nicht geklärt, auf welcheWeise diese Proteine den Ca2+-Haushalt aufrecht erhalten. Es stellt sich insbesonderedie Frage, ob TRP und ORAI Proteine eine physikalische Interaktion miteinandereingehen und heteromere Kanalkomplexe ausbilden. Die Klasse der STIMProteinefungiert als Ca2+-Sensoren am endoplasmatischen Retikulum. STIM1-Proteine interagieren physikalisch mit ORAI1-Proteinen. Es wird angenommen,dass Signalkomplexe zwischen den beiden zuletzt genannten Proteinen die Feinregulationdes Ca2+-Haushaltes bewirken. In jedem Fall stellen TRPC und ORAIinteressante pharmazeutische Zielobjekte für zukünftige therapeutische Strategiendar.In dieser Diplomarbeit wurden basophile Leukämie-Zellen von Ratten als Modellsystemzur Untersuchung der oben genannten Proteine verwendet. Methoden wie ImmunoprezipitationundWestern-Blotting wurden zur Analyse der Proteinbestandteilesowie möglichen Interaktionen zwischen TRPC und ORAI angewandt. Die Ergebnisseder Untersuchungen deuten auf eine Interaktion zwischen ORAI1 und TRPC3im Wildtyp der basophilen Leukämie-Zellen hin. Es empfiehlt sich aufbauend aufdiesen Ergebnissen, weitere proteomische Analyseverfahren durchzuführen.

Abstract (English)

The canonical transient receptor potential proteins (TRP) function as ion channelsin various cell-types throughout the body. ORAI is also identified to be a poreformingmembrane protein, which contributes to store-operated Ca2+-entry. It isstill unclear, how these proteins contribute to calcium-homeostasis and if there is aphysical and functional interaction by formation of heteromeric channel complexes.STIM proteins serve as Ca2+ sensors within the endoplasmic reticulum and physicallyinteract with ORAI proteins. Fine-regulation of Ca2+ signals is suggested tooccur via signaling complexes including the last mentioned proteins. Further studiesare still necessary in order to evaluate the relationship between those and otherproteins. Still, both families of TRPC and ORAI represent interesting targets forfuture therapeutic strategies.In this dipoma thesis, rat basophil leukemia cells are utilized as model system for theinvestigation of the proteins mentioned above. Immunoprecipitation and Westernblotting were used as primary tools for the analysis of protein content and potentialinteractions between ORAI1 and TRPC3. Our results indicate interaction betweenORAI1 and TRPC3 in wild-type rat basophilic leukemia cells.